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大腸桿菌表達系統

服務簡介

大腸桿菌表達系統具有遺傳背景清晰,培養周期短,易于放大生產,抗污染能力強等諸多優點,是目前應用最為廣泛的表達系統之一。普健生物經過十多年的打磨,建立了3H(High through、High efficiency、High quality) 大腸桿菌表達系統,平臺的表達成功率大于95%;獨有的表達純化以及復性平臺,已成功交付上萬例大腸桿菌表達服務項目。

服務優勢

1. 普健生物具有十幾年的蛋白表達經驗,15臺中大型微生物培養搖床及發酵設備、12臺超聲破碎儀、中試型高壓均質儀等配套設備,可以實現高通量,大規模大腸桿菌表達生產

2. 具有多種大腸桿菌表達載體pET系列、pGEX系列等;多種表達宿主:標準表達菌株、可增強蛋白表達的菌株T7E、表達毒性蛋白的C41、增強蛋白可溶性表達的超低溫菌株Arctic、以及其它經過AtaGenix優化改造的菌株;通過不同載體和菌株的優化組合,可以實現蛋白的高效表達,蛋白表達成功率超過95%

3. 普健生物具有完善的大腸桿菌表達、純化、內毒素控制生產線,可以生產高質量蛋白,用于細胞活性實驗,動物實驗等,滿足高質量的蛋白使用需求

 

服務流程

案例展示

大腸桿菌表達蛋白A

1.表達體系優化:包括宿主菌、誘導溫度、誘導時間、誘導劑的濃度及培養基。

宿主菌

誘導溫度

誘導時間

誘導劑

培養基

T7E,BL21,C41,Arctic

30℃/37℃

1h/4h

IPTG

LB/自誘導培養基

 

蛋白A的搖瓶表達量為8 mg/L, 隨后進行了發酵條件的優化,包括培養基成分的優化、分批及補料的測試,70 L 分批發酵的表達量為60 mg/L。


2.3C酶去除蛋白MAT標簽,具體結果如圖3、圖4所示

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