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穩定細胞株構建

服務簡介

細胞轉染,是將外源分子(如 DNA,RNA 等)導入真核細胞中的一種技術;

轉染分為:瞬時轉染和穩定轉染

瞬時轉染:指外源 DNA 或 RNA 轉入宿主細胞后不整合到宿主染色體中進行外源目的基因的表達

穩定轉染:指外源 DNA 轉入宿主細胞后將外源目的基因整合到宿主染色體中進行表達

穩定轉染的特點:

1. 目的基因整合到染色體上,需要使用線性 DNA(線性 DNA 雖然比超螺旋狀的 DNA 轉入量低,但整合率高)

2. 外源 DNA 整合到宿主細胞染色體中大約為 1%,通常需要通過一些選擇性標記反復篩選,才能得到穩定轉染的同源細胞系

3. 隨宿主細胞基因組復制、轉錄、翻譯,并被穩定遺傳

4. 用于獲得穩定表達的外源基因的單細胞克?。喝绱笠幠5鞍踪|的合成,長期的藥理學研究遺傳機制的研究等

穩定細胞株:一般是將外源 DNA 克隆到具有某種抗性或者選擇基因的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到染色體中,用載體中所含的選擇標志進行篩選,篩選得到可穩定表達目的蛋白的細胞株

 

穩定細胞株構建流程

服務優勢

高質:外源基因嚴格鑒定,細胞來源清晰,無污染

高產:重組蛋白 / 抗體表達量可快速優化至 2g/L 以上穩定表達

穩定:獨有的 GS 穩轉系列載體配合 MSX 藥物篩選,實現穩定傳代 15 代以上

快速:篩選高產細胞株,周期短至 3 個月

靈活定制:可針對重組蛋白 / 抗體全長或片段進行個性化表達

經驗豐富:專業的技術團隊,已成功為國內外多家醫藥公司和研究單位構建交付穩定細胞株

多篩選系統:G418/ 潮霉素 / 嘌呤霉素篩選系統,GS/DHFR 雙基因篩選系統等

服務內容

服務項目

客戶提供

服務內容

服務周期

交付內容

穩定細胞株構建

基因序列

載體

細胞

重組表達質粒構建

1周

1-3株細胞株

技術服務報告

藥物本底濃度測定

1-2周

細胞轉染

1天

多克隆穩定細胞株篩選及鑒定

2-3月

單克隆穩定細胞株篩選及鑒定

2月

穩轉細胞株產量、活性檢測及穩定性研究(可選)

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案例展示

構建生產重組抗體的CHO穩定細胞株

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