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修飾性抗體制備

服務簡介

蛋白質是調控各種細胞功能的重要執行者,決定著生命活動能否有序、高效的進行,而蛋白質翻譯后修飾 (Protein translational modifications,PTMs) 則在這一過程中起著至關重要的作用。PTMs通過功能基團或蛋白質的共價添加、調節亞基的蛋白水解切割或整個蛋白質的降解,進而改變其化學性質或結構,使得蛋白質具有更為復雜的結構和豐富多樣的功能,最終實現生物學功能的精細調節。這些修飾包括磷酸化、糖基化、泛素化、乙?;?、亞硝基化、甲基化、琥珀?;鹊?。PTMs對細胞生物學、疾病發病機制和治療預防的研究中起到至關重要的作用。

磷酸化:

蛋白質轉錄后修飾,特別是蛋白質的磷酸化,參與了體內幾乎所有的細胞活動,因此檢測磷酸化蛋白對研究多種發育障礙及人類疾病至關重要。磷酸化抗體可以特異性識別磷酸化的氨基酸位點。磷酸化抗體可以用于區分蛋白質的磷酸化及非磷酸化的存在形式,可用于對磷酸化蛋白進行定性、定量分析。

甲基化:

蛋白質甲基化也是翻譯后修飾的一種形式,一般指精氨酸或賴氨酸在蛋白質序列中的甲基化。在組蛋白中,蛋白質甲基化是被研究最多的一類,某些組蛋白殘基通過甲基化可以抑制或激活基因表達,與癌癥、衰老、老年癡呆等許多疾病密切相關,是表觀遺傳學的重要研究內容之一,因此檢測甲基化蛋白意義重大。甲基化抗體可以特異性識別甲基化的氨基酸位點,可以用于區分蛋白質的甲基化及非甲基化的存在形式,可用于對甲基化蛋白進行定性、定量分析。

乙?;?/p>

蛋白質乙?;侵冈谝阴;D移酶的作用下,在蛋白質賴氨酸殘基上添加乙?;倪^程,是細胞控制基因表達,蛋白質活性或生理過程的一種機制。乙?;贵w可以特異性識別乙?;陌被嵛稽c,可以用于區分蛋白質的乙?;胺且阴;拇嬖谛问?,可用于對乙?;鞍走M行定性、定量分析。

糖基化:

糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。根據 糖苷鏈類型,哺乳動物的蛋白質糖基化可以分為三類,即以Ser、Thr、Hpy和Hly的羥基的氧原子為連接點,形成-0-糖苷鍵型。以Asn的酰胺基、N一末端氨基酸的 α - 氨基以及Lys或Arg的ω - 氨基為連接點,形成-N-糖苷鍵型。由乙醇胺磷酸鹽、三個甘露糖苷、葡萄糖胺以及纖維醇磷脂組成的GPI糖基磷脂酰肌醇錨。糖基化抗體可以特異性識別糖基化的氨基酸位點,可以用于區分蛋白質的糖基化及非糖基化的存在形式,可用于對糖基化蛋白進行定性、定量分析。

琥珀?;?/p>

賴氨酸是最容易被修飾的氨基酸基團之一,其修飾包括甲基化、泛素化、磷酸化、乙?;?、糖基化和丙?;?,它通常在功能調節中發揮重要作用。在2010年芝加哥大學團隊首次報告了賴氨酸琥珀?;╨ysine succinylation)這種新型蛋白質的翻譯后修飾。來自3個蛋白(異檸檬酸脫氫酶、絲氨酸羥甲基轉移酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶A (GAPDH))之中,鑒定了4個琥珀酰賴氨酸候選肽,通過western blot分析、體內同位素琥珀酸標記、MS/MS和HPLC洗脫對相應合成肽進行驗證,證明所鑒定的琥珀酰-賴氨酸肽段來自體內蛋白。這種修飾可以對不同生理環境做出應答,并且在進化上是保守的。通過抗琥珀酰賴氨酸抗體的親和純化,在14個大腸桿菌蛋白之中鑒定出69個琥珀酰賴氨酸位點。結果表明,賴氨酸琥珀?;且环N自然發生的賴氨酸修飾。

乳酸化:

細胞代謝為所有生命過程提供能量和材料來源,腫瘤細胞的一個重要特征是重度依賴糖酵解產生大量乳酸,被稱為“瓦伯格效應 ”(Warburg effect),此現象于1924被德國科學家Otto. Warburg首次提出。瓦伯格效應不但在腫瘤中存在,在免疫細胞激活,細胞重編程等過程中也廣泛存在。
2019年10月24日,芝加哥大學趙英明教授課題組(共同一作為Di Zhang和Zhanyun Tang)在Nature雜志發表研究,首次報道了乳酸作為組蛋白翻譯后的一種修飾,發揮著基因轉錄調控的功能。這項最新發現成為該領域的最新突破,不僅幫助人們對乳酸的功能有了嶄新的理解,而且將促使醫學生物學者們重新審視“瓦伯格效應”這個腫瘤研究中的經典機制。研究者運用質譜,液相色譜,同位素標記,以及免疫學等多種手段鑒定并驗證了在人和小鼠的細胞中,組蛋白賴氨酸上的乳酸化修飾廣泛存在

普健生物可提供各種修飾類型的抗體制備技術服務,修飾類型包括磷酸化,甲基化,乙?;?,琥珀?;?,乳酸化,糖基化等。

 

服務優勢

1.免費的抗原設計:只需要客戶提供抗原蛋白序列和修飾位點

2.穩定的多肽合成技術:磷酸化,甲基化,乙?;?,糖基化,琥珀?;?,乳酸化

3.可靠的抗體純化技術:修飾性與非修飾性多肽兩輪親和純化

4.多抗/單抗可自由選擇

服務內容

服務項目

客戶提供

服務內容

服務周期

交付內容

修飾性多抗制備

抗原信息

多肽設計

多肽合成及偶聯

動物免疫

抗血清檢測

抗體純化

抗體質檢

實驗報告

10-12周

多肽

未純化抗血清小樣

純化抗體3-5 mg

技術服務報告

 

服務項目

客戶提供

服務內容

服務周期

交付內容

修飾性單抗制備

抗原信息

抗原設計

多肽合成及偶聯

免疫(大鼠/小鼠)

融合

亞克隆

抗體生產及質檢

實驗報告

4-5個月

多肽

單克隆抗體2 mg

單克隆細胞株(1-3株)

技術服務報告

案例展示

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